颠覆性创新 | AAV基因治疗青光眼取得重大突破

青光眼（Glaucoma）是一组以视乳头萎缩及凹陷、视野缺损及视力下降为共同特征的疾病，病理性眼压增高是其致病主要风险因素。青光眼的临床分型包括先天性、继发性和原发性三种类型，其中原发性青光眼是主要的类型。青光眼发病迅速、危害性大，在导致人类失明的三大致盲眼病之中位居第二。

虽然手术治疗是降低青光眼眼压的常规治疗手段，但治疗效果并不理想。基因治疗作为一种全新手段，为青光眼的治疗提供了理想的解决方案。目前主要的基因治疗技术路线是视神经及视网膜神经节细胞的保护性治疗和改善房水循环。

青光眼导致的视网膜神经节细胞（retinal ganglion cell，RGC）凋亡的激发因素主要有神经营养因子的剥夺和兴奋性毒素一氧化氮的毒性作用。已有研究表明重复眼内注射神经营养因子能暂时性拯救因轴突损伤导致的RGC死亡。采用基因疗法转染这些营养因子，能克服重复注射带来的并发症。

另外影响与房水生成相关的几个步骤如减少房水的生成、疏通房水流出通道增加房水的排出，可以有效改善房水循环。小梁网是房水排出的主要通道。小梁网细胞是疏通房水流出通道、降低眼压、治疗青光眼的主要靶细胞。有关动物实验证明，双链腺相关病毒载体（self-complementary adeno-associated virus，scAAV）携带报告基因前房注射可有效地转导猴小梁网细胞，持续稳定地表达报告基因长达1年以上，且安全性良好。由于青光眼基因治疗通常需要转导基因在小梁网细胞中持续稳定表达，而且不引起明显的副作用，因此AAV载体因其高转染效率和安全性，近年来已成为眼科遗传病基因治疗的首选病毒载体。目前，Biogen、罗氏、诺华等国际医药巨头竞相通过整体收购Nightstar、Spark等眼科遗传病基因治疗公司，迅速进行战略布局，看中的正是AAV载体平台在眼科遗传病基因治疗中的关键作用。

近期厦门大学厦门眼科中心刘旭阳教授研究团队发表了论文《scAAV2-Mediated C3 Transferase Gene Therapy in a Rat Model with Retinal Ischemia/Reperfusion Injuries》（Molecular Therapy-Methods & Clinical Development. 2020 Jun 12; 17:894–903 ），报告了其团队在青光眼的基因治疗药物研发领域最新进展。

他们将编码C3蛋白(scAAV2-C3)或增强绿色荧光蛋白(scAAV2- egfp)的自补充腺相关病毒2 (scAAV2)载体经玻璃体腔注射进入大鼠双眼，研究基于外酶C3转移酶(C3)的基因治疗在缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠模型中对视网膜的保护作用。结果显示，在I/R损伤后，scAAV2-C3显著降低了RGCs的凋亡数量，减少了神经节细胞层的细胞损失，且在I/R损伤后的视网膜中，用scAAV2-C3处理的视网膜厚度最大。结果表明，scaav2介导的C3基因治疗能够保护大鼠视网膜免受I/R损伤，在未来青光眼治疗中具有很高的应用价值。

北京五加和基因团队作为病毒制备合作方圆满完成了实验使用的重组病毒载体scAAV2-C3的制备工作。

由于AAV载体临床级制备技术复杂、生产难度极高，是国际公认的当前制约基因治疗大规模应用的关键技术瓶颈之一，国内能够胜任的病毒载体平台公司可谓凤毛麟角。北京五加和基因科技有限公司是北京市高新技术企业，中关村高精尖产业协同创新平台和北京经开区中试基地，长期致力于病毒载体创新技术的研发和基因治疗药物的产业化，在AAV载体平台技术上具有核心竞争力。公司目前在建的大兴4000余平米的病毒载体CDMO平台代表着国内病毒载体临床级生产的最高水平，业务涵盖了基因药物的早期研发和临床试验申报（pre-IND）所需的工艺开发和小试、中试、临床样品的制备，全方位的为客户提供一体化的CDMO解决方案。